每日手術開始前，應提前30分鐘(百級手術間提前15分鐘)開啟凈化空調系統，在使用中應注意將凈化手術室內的溫度控制在22～25℃，濕度控制在40%～60%，術中由巡回護士根據手術醫生和患者的需要隨時調節室溫，在調節空調的溫度時應注意調節的幅度不要過大，應逐步調節，每次調節2～3℃，直到達到要求的溫度，冬季使用暖氣時，應注意不要將溫度調節的過高，因為暖空氣具有上升力，會對垂直下降的氣流形成阻力，干擾垂直氣流，從而降低層流凈化的效果，因此一般冬季室內溫度宜設置在25℃。在手術間內做各項護理操作時注意動作語言的輕柔準確，保持手術間內的安靜，維持室內噪音<50dB。

 設專職人員嚴格控制人員出入，出入手術間人員愈多則凈化間內的空氣污染愈重，因此必須嚴格控制人員進入凈化手術室。對必須進入手術間的會診大夫或者參觀人員，進入手術間時必須穿著嚴格消毒過的專用衣褲和鞋。其他無關人員一律禁止入內，并且嚴格控制每個手術間的參觀人員。每個手術間的參觀人員不得超過3人。